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必要时，可在实验台面上，让一端接触台面而另一端轻轻跌落数次并互换位置。
然后把薄层板放在水平的长玻璃板上晾干，半小时至数小时[3]后移入烘箱内，缓慢升温至110℃，恒温半小时，此谓活化[4]。
取出，稍冷后置于干燥器中备用。
3. 点样
在距薄层板一端0.5~1cm处，用铅笔轻轻地画一条线，作为起点线。
用毛细管（内径小于１mm）吸取样品溶液（一般以氯仿、丙酮、甲醇、乙醇、苯、乙醚或四氯化碳等作溶剂，配成1％溶液），垂直地轻轻接触到薄层的起点线上，称为点样。
若溶液太稀，待第一次点样干后，再点第二次，每次点样都应在同一圆心上。
点的次数依样品溶液浓度而定，一般为2～3次。
若样品的量太少，则有的成分不易显出；若量太多则易造成斑点过大，互相交叉或拖尾，不能得到很好的分离效果。
点样后斑点直径以扩散成１～2mm圆点为度。
若为多处点样时，则点样间距为0.5～1cm。
薄层色谱展开剂的选择和柱色谱一样，主要根据样品的极性、溶解度、吸附剂的活性等因素来考虑。
溶剂的极性越大，则对化合物的洗脱力也越大，即Rf值也越大。
良好的分离Rf值应在0.15～0.75之间。
如发现样品各组分的Rf值较大，可考虑换用一种极性较小的溶剂，或在原来的溶剂中加入适量极性较小的溶剂去展开，反之亦然。
薄层色谱用的展开剂绝大多数是有机溶剂，各种溶剂的极性参见柱色谱部分。
薄层的展开需在密闭的容器（层析缸）中进行。
先将展开剂放在层析缸中，液层高度约0.5cm，在层析缸中衬一滤纸，使展开剂蒸气饱和5～10min。
再将点好样品的薄板按图248所示放入层析缸中进行展开。
注意：展开剂液面的高度应低于样品斑点。
在展开过程中，样品斑点随着展开剂向上迁移，当展开剂前沿至薄层板上边约0.5cm时，立刻取出薄层板，用铅笔或小针画出溶剂前沿的位置，放平晾干后即可显色。
图248薄层层析的展开装置
5. 显色
如果化合物本身有颜色，展开后就可直接观察它的斑点。
但大多数有机化合物是无色的，看不到色斑，只有通过显色才能使斑点显现。
常用的显色方法有显色剂法和紫外光显色法。
① 显色剂法：在溶剂蒸发前用显色剂喷雾显色。
不同类型的化合物需选用不同的显色剂，见表29。
薄层色谱还可使用腐蚀性的显色剂如浓硫酸、浓盐酸和浓磷酸等。
也可用卤素斑点试验法来使薄层色谱斑点显色。
许多有机化合物能与碘生成棕色或黄色的配合物。
利用这一性质可将几粒碘置于密闭容器中，待容器充满碘蒸气后，将展开后的色谱板放表29一些常用显色剂的配制及使用范围
显色剂配制方法能被检出对象浓硫酸98%大多数有机化合物在加热后可显出黑色斑点碘蒸气将薄层板放入缸内被碘蒸气饱和数分钟很多有机化合物显黄棕色（烷烃和卤代烃除外）碘的氯仿溶液0.5%碘氯仿溶液很多有机化合物显黄棕色（烷烃和卤代烃除外）磷钼酸乙醇溶液5%磷钼酸乙醇溶液，喷后120℃烘，还原性物质显蓝色，氨薰，背景变为无色还原性物质显蓝色铁氰化钾三氯化铁试剂1%铁氰化钾，１%三氯化铁使用前等量混合还原性物质显蓝色，再喷2molL盐酸，蓝色加深，检酚、胺、还原性物质四氯邻苯二甲酸酐2%溶液，溶剂∶丙酮氯仿（体积比10∶1）芳烃硝酸铈铵6%硝酸铈铵的2molL硝酸薄层板在105℃烘5min，喷显色剂，多元醇在黄色底色上有棕黄色斑点香兰素硫酸3g香兰素溶于95%100mL乙醇中，再加入0.5mL浓硫酸高级醇及酮呈绿色茚三酮0.3g茚三酮溶于100mL乙醇，喷后，100℃热至斑点出现氨基酸、胺、氨基糖、蛋白质入，碘与展开后的有机化合物可逆地结合，在几秒钟到数分钟内化合物斑点的位置呈黄棕色。
色谱板自容器取出后，呈现的斑点一般在几秒钟内消失，因此必须用铅笔标出化合物的位置。
碘熏显色法是观察无色物质的一种简便有效的方法，因为碘可以与除烷烃和卤代烃以外的大多数有机物形成有色配合物。
三、仪器与试剂
1． 仪器
层析缸、载玻片、研钵、点样毛细管、镊子、烧杯、紫外分析仪、铅笔、直尺。
2. 试剂
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